Другим способом
преодоления ограничений связанных с внедрением в перепрограммируемые клетки
вирусов или вирусной ДНК, а также с избыточной активностью генов плюрипотенции
является использование микро РНК ([lxv], [lxvi] ).
Появился даже новый термин миРИПС (mir iPS) для обозначения ИПСК полученных с помощью
микроРНК ([lxvii]). Использование микро РНК может
позволить проводить контролируемое перепрограммирование (трансдифференцировку)
клеток непосредственно из одного типа дифференцированных клеток в другой минуя
необходимость возвращать клетки в состояние плюрипотенции ([lxviii]).
Обнаружено, что ингибирование семейства микроРНК - let-7, которые регулируют синтез факторов RAS (Ras GTPases) ([lxix]), приводит к дедифференцировке соматических клеток ([lxx]). Подавление TGF-β рецептора II с помощью микро РНК miR-93 повышает образование ИПСК ([lxxi]). Использование микроРНК уже приносит
обнадеживающие результаты. Так, например, появились методы,
позволяющие повысить эффективность перепрограммирования на два порядка по
сравнению со стандартным методом ([lxxii]).
Суть этих методов в
использовании кластера микро
РНК miR302/367 которые синтезируются
в больших количествах только в эмбриональных стволовых клетках, но не во
взрослых стволовых клетках или эмбриональных, но дифференцированных клетках ([lxxiii]). Функционально
кластер miR302/367
является регулятором клеточного цикла в ЭС клетках поддерживающих
самообновление и плюрипотентность. Показано, что он действует на сигнальный путь TGFβ/Nodal понижая на посттранскрипционном уровне
активность Lefty1 и Lefty2 являющихся
ингибиторами Nodal (т.е. посредством Smad-2/3 сигнализации). Это
действие кластера miR302/367
предотвращает образование маркеров характерных для образования зародышевых
мезодермы, эндодермы и эктодермы ([lxxiv]). Перепрограммирование достигается за
счет активации эндогенного онкогена Oct4 под воздействием miR367 и подавления гистон деацетилазы 2 - Hdac2 ([lxxv])
. Далее см. Oct4, Е-кадхерин, Nr5a2 и трансактивирирующие домены MyoD
и VP16 повышают эффективность перепрограммирования
|