Среда, 12.12.2018
БИОРЕГЕНЕРАЦИЯ
Меню сайта
Категории раздела
Мои файлы [33]
Статистика

Онлайн всего: 1
Гостей: 1
Пользователей: 0
Форма входа
Главная » Файлы » Мои файлы

Способы прямой трансдифференцировки соматических взрослых клеток
[ Скачать с сервера (384.0 Kb) ] 02.08.2011, 20:51

Альтернативным подходом к перепрограммированию клеток для автологичной  (самому себе) клеточной терапии, дающим   возможность избежать целого списка осложнений, связанных с использованием плюрипотентных клеток (опухолей и т.д.) является метод получения клеток крови из кожи без промежуточной стадии индуцированных плюрипотентных стволовых клеток ([xcii]).  Метод основан на внедрении гена Oct4, и  добавлении цитокинов, что позволяет перепрограммировать фибробласты кожи так, что те порождают линии гранулоцитов, моноцитов, мегакариоцитов и эритроидных клеток. При этом важным преимуществом является то, что образующиеся клетки крови относятся к взрослому типу клеток  ([xciii]), а не к эмбриональным клеткам крови, которые обычно образуются из ИПСК или ЭСК. Предполагается, что этот подход позволит в недалеком будущем делать переливания крови пациентам с анемией, при хирургических вмешательствах, больным раком и т. д., кровью полученной из их собственной кожи.   Стратегия аналогичного подхода разработана и для получения кардиомиоцитов ([xciv]) и клеток печени ([xcv]). Идентифицированы транскрипционные факторы, которые могут служить для разработки «коктейля» факторов необходимых для прямой трансдифференцировки соматических взрослых клеток непосредственно в клетки печени – гепатоциты ([xcvi]). Вызвав избыточный синтез транскрипционных факторов Ascl1, Brn2, и  Myt1l  удалось преобразовать фибробласты человека непосредственно  в нейроны ([xcvii]).

        Еще один способ перепрограммирования заключается в поэтапном моделировании на скелетной мышце млекопитающих процессов, которые происходят у амфибий при регенерации конечности. Ключевыми событиями при этой регенерации являются:  1.) разделение мышечного волокна, представляющего собой многоядерный синтиций, на отдельные одноядерные клетки – клеткаризация (fiber cellularization) и  2.) последующая дедифференцировка ([xcviii]). Оказалось, что клеткаризацию мышечных волокон можно вызвать  их инкубацией с миосеверином (myoseverin) ([xcix]) который разрушает сеть микротубул ([c], [ci]).

 Активную пролиферацию и дедифференциацию образовавшихся клеток позволяет вызвать ингибирование синтеза (кодируемого геном CDKN 1A) белка p21, который, как известно, является регулятором клеточного цикла в стадии G1, когда происходит выбор, будет ли клетка делиться, пройдя точку рестрикции ([cii]), или будет находиться в состоянии покоя.  Дальнейшая дифференцировка полученных клеток в немышечные (адипогенные, остеогенные и др.) прогениторные клетки достигается  с помощью небольшой молекулы ([ciii]) называемой реверсином  (reversine (2-(4-morpholinoanilino)-6-cyclohexylaminopurine).

     Таким образом, с помощью химических веществ, в условиях культуры мышечных клеток млекопитающих, которые, как известно, не способны регенерировать конечности, удалось индуцировать процессы аналогичные тем которые протекают при регенерации конечностей у амфибий ([civ]). см.рис 3.2.2 

    Следует отметить, что  прогениторные клетки бластемы отличаются как от эмбриональных стволовых клеток, так и от ИПСК тем, что хотя они и дедифференцированы, но не до такой степени плюрипотентности. Эмбриональные стволовые клетки, а также ИПСК можно использовать для клонирования целого организма, но они непригодны для бластемы, задача которой восстановить конкретную часть организма (руку или ее часть, ногу, почку, сетчатку глаза, зуб и т.д.).                                                                                                                                                 Есть надежды, что можно будет активировать регенерацию путем стимуляции образования прогениторных мышечных клеток с помощью инъекций интерференционных РНК ингибирующих Rb и ARF. Известно, что мишенью Rb (ген подавляющий опухоль - ретинобластому) является важный для регенерации сердца ([cv]) фермент PLK1 (Polo-like kinase 1), необходимый для митоза и подавления регулируемого белком p53 апоптоза ([cvi] [cvii]). В экспериментах с генами Rb и Ink4A (продуктом гена ARF, который присутствует в геноме высших позвоночных животных, но отсутствует у тритона и саламандры) было показано, что инактивация Rb приводит к активации деления мышечных клеток у саламандры (но не у млекопитающих). Совместное отключение (с помощью «нокдауна генов» интерференционной РНК) и ARF и Rb приводит к дедифференцировке клеток млекопитающего (мыши) и их активной пролиферации как у раковых клеток. 

Далее см. Изменения связанные с образованием регенерационной бластемы

Категория: Мои файлы | Добавил: анатомнет
Просмотров: 695 | Загрузок: 36 | Комментарии: 1 | Рейтинг: 0.0/0
Всего комментариев: 0
Имя *:
Email *:
Код *:
Поиск
Друзья сайта
  • Официальный блог
  • Сообщество uCoz
  • FAQ по системе
  • Инструкции для uCoz
  • Copyright MyCorp © 2018
    Бесплатный хостинг uCoz